Identificazione del gene di una nuova leucodistrofia con atassia, sordità e cardiomiopatia

Object: This paper described a new clinical entity of leukodistrophy and the genetic study for gene’s identification. Clinical phenotype: We reported initially three patients, from a large consanguineous family, showing a distinctive white matter disease, at early onset, with a clinical phenotype characterized by slowly progressive cerebellar ataxia and spasticity. Liver enzymes were elevated in the patients, but extensive neurometabolic studies failed to detect any specific biochemical abnormalities. As this disease progressed, all patients experienced sensory-neural deafness, resulting in complete hearing loss, and developed a restrictive cardiomyopathy after the age of 13 years and leading to death in two cases. In the three propositi, brain MRI showed a diffuse abnormal white matter signal on T2-weighted images . Genetical descriptions: Aiming at the identification of the specific gene, we performed a genomewide linkage analysis in affected and not-affected members of this first family. Due to the high consanguinity, we initially used the DNA pooling method to look for the region of homozygosity. Using a set of microsatellite markers distributed along the 22 autosomes, we detected initially 21 candidate regions. Extending the analysis to individual DNA from the non affected siblings, and using additional markers, we found a likely region of homozygosity on chromosome 1p34.3-p33. We analyzed the coding sequence and flanking intronic regions of these genes, and we found a missence mutation liable to this leuckodistrophy. In the same time, we analysed a second consanguineous family in which the same clinical phenotype was present. The sequencing of the genes allowed finding 2 homozygote variations in gene ADCL for the 2 families.

Oggetto: Il presente lavoro descrive una nuova entità clinica di leucodistrofia e lo studio genetico effettuato per il riconoscimento del gene responsabile. Descrizione del fenotipo clinico: Si tratta di una nuova malattia neurodegenerativa riscontrata inizialmente in 3 individui appartenenti ad una famiglia multiconsanguinea. L’esordio è precoce e caratterizzato da una sindrome atassica lentamente progressiva e spasticità. Successivamente i pazienti presentano una ipoacusia neurosensoriale, che evolve in una sordità completa. Infine sviluppano una cardiomiopatia rapidamente ingravescente, causa del decesso entro la seconda decade di vita. La risonanza magnetica evidenzia alterazioni diffuse della sostanza bianca nelle sequenze T2 pesate. Un estensivo screening neurometabolico ha evidenziato unicamente un lieve incremento dei valori degli enzimi epatici. Caratterizzazione genetica: Per ricercare il gene responsabile di questa nuova condizione clinica, è stato effettuato uno studio di linkage. Mediante l’utilizzo di 384 primers, è stato analizzato l’intero genoma dei 3 probandi, attraverso la tecnica del DNA pooling, che ha consentito di selezionare 21 regioni candidate. Inserendo tutti i primers informativi, analizzando l’intera famiglia, e attraverso lo studio di analisi dell’aplotipo, è stato identificato il locus sul braccio corto del cromosoma 1 (1p34). Tramite sequenza diretta, sono state analizzate le porzioni codificanti di tutti i geni presenti all’interno della regione e le loro sequenze introniche fiancheggianti. E’ stata così trovata una mutazione puntiforme missenso, non rilevata nella popolazione generale, responsabile della sindrome. Sono stati individuati, successivamente, altri 4 pazienti, con caratteristiche cliniche sovrapponibili, non legati alla nostra famiglia, con una variante della stessa mutazione.