La proteina del retinoblastoma è essenziale per l'induzione dello stato postmitotico del muscolo scheletrico, ma non per il suo mantenimento

Nel programma differenziativo muscolare la proteina del retinoblastoma (pRb) è richiesta per lo svolgimento del programma differenziativo, essendo assolutamente necessaria sia per il raggiungimento dello stato postmitotico che per l’espressione delle proteine muscolo specifiche. Sebbene non sia mai stato dimostrato, è opinione generale che poiché pRb è richiesta per l’uscita definitiva dal ciclo cellulare, la sua presenza continui ad essere fondamentale per il mantenimento dello stato postmitotico. Il proposito di verificare questa assunzione è stato perseguito utilizzando mioblasti knockout condizionali RbLoxP, che possono essere indotti a differenziare terminalmente in presenza di pRb, e solo successivamente sottoposti a delezione per sopprimere l’espressione della proteina. Nonostante la delezione determini la completa scomparsa di pRb, i miotubi non sintetizzano DNA, mostrando che pRb non è richiesta per la preservazione dello stato postmitotico in cellule muscolari scheletriche. Nonostante ciò, la rimozione di pRb determina la comparsa di attività trascrizionale di E2F, di attività chinasica associata alle cicline E ed A e di espressione della DNA ligasi I, di PCNA, di RPA70 e di MCM2. La presenza di pRb, pur non essendo essenziale per il mantenimento dello stato postmitotico, è ancora necessaria per l’ottimale espressione dei geni muscolo-specifici nei miotubi. La trascrizione di vari geni muscolari viene infatti significativamente ridotta nei miotubi Rb-/-. Questi ultimi possono essere efficientemente indotti a sintetizzare DNA mediante l’espressione ectopica di ciclina D1 e di cdk4. Ciò indica fortemente l’esistenza di un altro bersaglio, oltre pRb, per queste molecole. E’ stata indagata la possibilità che tale bersaglio potesse essere costituito da una o entrambe le altre proteine appartenenti alla famiglia di pRb, p107 e p130, che, in questo caso, si sostituirebbero a pRb nel mantenere lo stato postmitotico muscolare. Questa ipotesi è stata smentita dal fatto che la completa delezione di Rb in miotubi p107-/-: p130-/- non comporta sintesi di DNA, indicando che lo stato postmitotico è preservato in assenza di pRb e degli altri componenti appartenenti alla sua famiglia. E’ possibile quindi concludere che lo stato postmitotico delle cellule muscolari scheletriche è mantenuto da almeno due meccanismi, uno dei quali è pRb-indipendente.