Identification of activating and repressing elements on gene Apaf1 promoter

Apaf1 svolge una funzione rilevante nella via apoptotica mitocondriale poichè forma l’apoptosoma, un complesso multimerico che attiva la caspasi iniziatrice 9. La proteina Apaf1 e’ coinvolta nell’apoptosi durante lo sviluppo, nel cancro e anche in altre funzioni indipendenti dall’apoptosi. Sebbene Apaf1 svolga questi ruoli importanti, la sua regolazione e’ ben lontana dall’essere chiarita. Abbiamo analizzato il promotore con lo scopo di identificare dei fattori trascrizionali capaci di regolarne l’attività. Abbiamo analizzato la sequenza in silico, cercando dei possibili siti di legame riconosciuti da fattori trascrizionali. Per verificare il ruolo di questi fattori nella regolazione del gene Apaf1, ne abbiamo testati alcuni sperimentalmente per la capacita’ di modulare l’attivita’ del promotore murino di Apaf1. Inoltre abbiamo prodotto per delezione diverse costruzioni geniche con lo scopo di identificare delle regioni importanti per la regolazione trascrizionale. In particolare abbiamo analizzato l’effetto del fattore trascizionale Pax4 sul gene Apaf1, osservando che questo causa un aumento dell’attività del promotore. Inoltre siamo stati in grado di identificare una regione di 50 bp, agente in cis, che regola negativamente l’attivita’ del promotore Apaf1.