Espressione e localizzazione subcellulare della Zinc Finger Protein 9, prodotto del gene della distrofia miotonica tipo 2

The genetic defect underlying myotonic dystrophy type 2 (DM2) is a CCTG expansion located in intron 1 of the zinc finger protein 9 (ZNF9) gene in chromosome 3q21. ZNF9 is a 19kDa highly conserved protein expressed in various tissues, but its cellular localization and function are still unclear. We have therefore used a previously characterized polyclonal antibody to detect by immunofluorescence (IF) the subcellular localization of ZNF9 in normal human and rat skeletal muscle. In longitudinally sectioned myofibers, IF reactivity for ZNF9 appeared as regular transverse bands 1-1.2 μm thick, throughout the fiber width. In double IF experiments observed by confocal microscopy, ZNF9 showed co-localization with proteins localized at the I-Z band junction such as the sarcoplasmic reticulum Ca/Mg ATPase, the T12 region of titin and desmin. Moreover, in DM2 muscle the ZNF9 intracellular distribution was comparable to that of control. These data indicate that ZNF9 is highly expressed in normal myofibers and its cellular distribution is apparently not disrupted in DM2.

Il difetto genetico alla base della distrofia miotonica di tipo 2 (DM2) è una espansione CCTG localizzata nell’introne 1 della zinc finger protein 9 (ZNF9) (cromosoma 3q21). ZNF9 è una proteina di 19kDalton di peso molecolare, altamente conservata ed espressa in numerosi tessuti, ma la sua localizzazione cellulare e la sua funzione sono ancora sconosciute. Pertanto, abbiamo utilizzato un anticorpo policlonale precedentemente caratterizzato per studiare attraverso esperimenti di immunofluorescenza (IF) la localizzazione subcellulare di ZNF9 nel tessuto muscolare normale umano e di ratto. In sezioni muscolari longitudinali, l’anticorpo per ZNF9 mostrava un pattern di bandeggiatura trasversale regolare di 1-2 μm di spessore che si estendeva per tutta la lunghezza della fibra. In esperimenti di doppia IF osservata al microscopio confocale, ZNF9 presentava una colocalizzazione con proteine localizzate a livello della giunzione I-Z come l’ATPasi del reticolo sarcoplasmatico Ca/Mg, la regione T12 della titina e la desmina. Inoltre, in sezioni muscolari di pazienti con DM2 la distribuzione intracellulare di ZNF9 risultava paragonabile a quella dei controlli. Questi dati indicano che la proteina ZNF9 è espressa ad un livello elevato nelle miofibrille normali e la sua distribuzione cellulare non è alterata nella DM2.