Linea guida del test dei micronuclei in Vicia faba per la valutazione di effetti mutageni in acque dolci e sedimenti.

In the present guideline a standardized method is described for the execution of the MicroNucleus test (MN-test) in Vicia faba root tip cells, which represents one of the most performed test for the detection of mutagenic effects in freshwater environments, due to its high sensitivity and reliability. This guideline contains: the methodology for germination and root growth from Vicia faba seeds; the methodology for cell preparation and for microscopic analysis; basic criteria for an appropriate exposure of roots to the environmental matrices to be tested; the criteria for micronucleus identification and analysis of their frequency; other cytogenetic parameters for a correct interpretation of results and their biological/environmental significance. The use of this test is also linked to the reduction in the use of animal testing which makes it particularly suitable for monitoring of polluted environments. Therefore, the procedures, the materials and the explanatory texts on the experimental planning, provide a useful support for the training of technicians engaged for these investigations.

Nella presente linea guida viene descritto un metodica standardizzata per l’esecuzione del test dei Micronuclei (MN-test) in apici radicali di Vicia faba, uno dei test maggiormente impiegati per lo studio degli effetti mutageni di ambienti di acque dolci poiché considerato tra i più sensibili e affidabili. La linea guida contiene: la metodologia per la germinazione e la crescita delle radici dai semi di Vicia faba, su cui eseguire il test; la metodologia per l’allestimento dei preparati cellulari da apici radicali per l’analisi microscopica; i criteri e le modalità di esposizione alle matrici ambientali da sottoporre al test; i criteri per l’identificazione dei micronuclei e per l’analisi della loro frequenza; altri parametri citogenetici utili per una corretta interpretazione dei risultati del test e del loro significato biologico /ambientale. L’impiego di questo test è altresì collegata alla riduzione dell’uso di test su animali, che lo rende particolarmente adatto per attività di monitoraggio in ambienti inquinati. Pertanto le procedure, i materiali utilizzati e le parti esplicative sulla pianificazione sperimentale forniscono un utile supporto per la formazione di tecnici specializzati per queste ricerche.